摘要： 目的 建立稳定表达肾癌G250基因与基因佐剂hGM-CSF基因编码蛋白的的HEK293细胞系。方法 通过脂质体转染的方法，将表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的双顺反子pIG250-GM真核表达质粒导入HEK293细胞中；经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系；用免疫组化、ELISA和Western Blot方法，检测目的蛋白在HEK293细胞中的表达。结果 经600 μg/mL的G418压力筛选后，获得了抗性细胞克隆；免疫组织化学方法检测到表达G250的阳性细胞；ELISA方法检测到pIG250-GM转染组细胞培养上清中hGM-CSF的表达与空载体对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；Western Blotting方法检测到G250蛋白的表达，分子量约54Ku，与预期大小相符。结论 成功建立可稳定表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的HEK293细胞系，为研究防治肾癌疫苗的免疫应答机制提供了实验基础。

关键词: 肾细胞癌, G250, hGM-CSF, G418抗性 HEK293细胞

中图分类号: 

• R737.11