岭南现代临床外科 ›› 2021, Vol. 21 ›› Issue (02): 177-181.DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2021.02.009
朱传华, 谢琳, 刘安民*
ZHU Chuan-hua, XIE Lin, LIU An-min
摘要: 目的 探讨蛋白二硫键异构酶家族成员4(PDIA4)基因在胶质瘤细胞中的表达及对细胞凋亡的影响。方法 下载并分析CGGA数据库RNAseq数据;收集人脑胶质瘤细胞系U251、U87和星形胶质细胞HA1800,用RT-qPCR法检测细胞系中的PDIA4表达水平;用siRNA转染U251细胞,沉默PDIA4的细胞株为si#768组和si#1829组,未转染为阴性对照组,转染siNC为空白对照组;用阿尔玛蓝(alarma blue)法、克隆形成实验检测转染细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;用蛋白免疫印记实验检测细胞中的cleaved-caspase3、cleaved-caspase 7蛋白表达水平。结果 CGGA数据库中,PDIA4在不同级别胶质瘤中的表达水平不同(P<0.05),PDIA4高表达组较低表达组生存预后较差(Log-rank=264.32, P<0.001);与HA1800相比,PDIA4在U251和U87中相对表达量升高(F=58.44,P<0.05);与空白组、阴性对照组相比,si#768组和si#1829组增殖和克隆集落形成能力受到抑制(均P<0.01),凋亡率(17.67±0.11%、19.50±9.30% vs. 3.72±7.11%、6.53±0.13%, F=51.06, P<0.05)明显升高;与阴性对照组相比,si#768组和si#1829组cleaved-caspase 7蛋白表达分别上调218.53%与169.68%,差异具有统计学意义(F=12.61,P<0.05)。结论 沉默PDIA4基因可能通过激活caspase通路促进胶质瘤细胞凋亡。
中图分类号: