岭南现代临床外科 ›› 2019, Vol. 19 ›› Issue (02): 154-161.DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2019.02.007
邹金茂， 李若梦， 练国达， 陈少杰， 陈茵婷*， 黄开红*
ZOU Jinmao， LI Ruomeng， LIAN Guoda， CHEN Shaojie, CHEN Yinting, HUANG Kaihong
摘要： 【摘要】 目的 建立一种多单链抗体修饰氧化铁纳米微粒的方法。方法 利用聚乙二醇（polyethylene glycol， PEG）及羧基（COOH group）修饰的氧化铁纳米微粒（Iron Oxide Nanoparticles， IONPs），以及抗MUC4、抗CEACAM6及抗CD44v6单链抗体（Single chain antibodies， scAbs），通过EDC/Sulfo?NHS交联剂将IONPs?PEG与3种scAbs进行交联，构建IONPs?PEG?multi scAbs复合物，再利用zeta粒度仪、透射电子显微镜（TEM）对IONPs?multi scAbs复合物进行表征，同时，在IONPs?PEG表面偶联荧光抗体，通过荧光强度测定其偶联效率；再鉴定复合物的抗原识别特异性及在放置1个月、6个月后评估复合物水溶液稳定性。结果 偶联3种scAbs后，IONPs?PEG?multi scAbs复合物的平均粒径为（23.6±0.5） nm，粒径分布集中，zeta电位约（?17.3±06） mV；TEM显示粒径约10 nm，荧光强度测定结果提示抗体偶联效率约为75%，细胞免疫荧光实验结果提示IONPs?PEG?multi scAbs复合物对高表达MUC4、CEACAM6及CD44v6分子的胰腺癌细胞BxPC?3具有特异性识别能力，证实该复合物具有良好的抗原识别特异性；在放置1个月、6个月后，偶联复合物的溶液分散性良好，放置6个月后平均粒径约（23.9±0.8） nm，zeta电位约（?17.6±0.4） mV，TEM拍照提示粒径约10 nm，细胞免疫荧光提示复合物抗原识别特异性良好。结论 本研究利用EDC/Sulfo?NHS交联剂组合，将3种单链抗体交联到PEG和羧基修饰的IONPs表面，构建IONPs?PEG?multi scAbs复合物，该方法偶联效率高，且复合物具有粒径小、分散性好、抗原识别特异性及水溶液稳定性好的特性。
中图分类号:
